人T-细胞可诱导共刺激分子（ICOS）ELISA

产品品牌：ZCIBIO（茁彩生物）

产品名称：人T-细胞可诱导共刺激分子（ICOS）ELISA 试剂盒

英文名称：Human ICOS ELISA kit

产品规格：48T/96T

实验样本：血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本

应用领域：仅供科研实验使用，不得用于临床诊断

我的标准曲线是平的或者是非线性的，这可能是由于什么原因引起的？
引起不理想的标准曲线的原因有很多，常见的原因例举如下：
◆ 确定稀释是否得当。
◆ 确定波长是否正确。
◆ 标准品和样品必需在15-20分钟内滴加入板内。（除非试剂盒内说明书特别说明）
◆ 检查背景是否过高。
◆ 确定酶标板是否正确洗涤。 不恰当的洗涤可能会引起具有高背景的平直曲线。
◆ 在测定过程中重复读板。在超过建议时间后读板会导致错误的结果。
◆ 如果高的标准品的读数超过了酶标仪的范围，确定标准品是否正确溶解，孵育时间和温度是否准确。
◆ 为保证实验准确性请重复测定。
◆ 如果使用对照，对照的浓度必须在测定范围内。
◆ 在检测和孵育过程中确定试剂没有被污染。
◆ 没有任何信号的平直标准曲线可能是由于酶结合物或者底物没有反应。 检查各个操作过程
◆ 由于许多酶标仪的限制，因此建议标准品检测由高向低做复孔。

 将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入微生物化的目标抗体，将未结合的生物素抗体洗净后，加入HRP标记和亲和素，再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。  

1. 样品收集后若在1周内进行检测的可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1 个月内检测)，或-80℃(3-6个月内检测)，避免反复冻融。

2. 试剂盒检测范围不等同于样本的浓度范围，如果您的样品中检测物浓度高于标准品高值，请根据实际情况，做适当倍数稀释(建议查阅文献后先做预实验，以确定稀释倍数)。

3. 若所检样本不在说明书所列样本之中，建议做预实验验证其检测有效性。

4. 若使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液,由于引入某些化学物质会导致ELISA测值出现偏差。

5. 若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在不被检出情况。

6. 某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配而出现不被检出的情况.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

从今日起，凡购买上海茁彩生物品牌的Elisa试剂盒，均可提供免费待测服务，为您提供专业的指导，在Elisa实际操作过程中，如遇到任何问题均可咨询。